
MM.1S細胞(人多發性骨髓瘤細胞係)
- 來源:外周血
- 細胞特征:淋巴母細胞樣,懸浮和輕微的貼壁同時存在
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:MM.1S主要特點是CD38高表達;MM.1S細胞表達糖皮質激素受體(ti) ,對地塞米鬆等類固醇藥物敏感
MM.1S細胞係源自一名對類固醇治療產(chan) 生耐藥性的多發性骨髓瘤(Multiple Myeloma, MM)患者外周血,是從(cong) MM.1母細胞株中分離出的亞(ya) 係,MM.1R是該細胞係的另一亞(ya) 係。與(yu) MM.1R細胞係對地塞米鬆(dexamethasone)耐藥不同,MM.1S對地塞米鬆保持敏感。
MM.1S細胞在複蘇後恢複正常生長的時間大約需要兩(liang) 周。
MM.1S細胞主要用於(yu) 多發性骨髓瘤的基礎研究,尤其是在類固醇的敏感性及耐藥機製研究方麵。由於(yu) 其獨特的生物學特性,MM.1S細胞也被用於(yu) 建立穩定表達熒光素酶(Luc)基因的轉染株,以便進行體(ti) 內(nei) 外成像及藥效評估。需要注意的是,MM.1S細胞僅(jin) 限用於(yu) 科研目的,不得用於(yu) 臨(lin) 床治療。
MM.1S細胞特性特征
細胞形態呈淋巴母細胞樣,主要以懸浮生長為(wei) 主,伴有輕微貼壁現象。
MM.1S細胞生長速度較慢,倍增時間約為(wei) 66至88小時,文獻常報道約80小時。
抗原表達:CD25+、CD38+、CD52+、CD59+
MM.1S細胞屬於(yu) B淋巴母細胞類型,表達lambda輕鏈免疫球蛋白,具備典型的多發性骨髓瘤免疫表型
表達的基因:λ輕鏈免疫球蛋白,符合多發性骨髓瘤的典型免疫表型。
表達糖皮質激素受體(ti) (glucocorticoid receptor),使其對地塞米鬆等類固醇藥物敏感。
MM.1S細胞對地塞米鬆敏感,區別於(yu) 其亞(ya) 係MM.1R的耐藥性。
作為(wei) 多發性骨髓瘤研究的經典模型,廣泛用於(yu) 類固醇敏感性及耐藥機製的基礎研究。
用於(yu) 藥物篩選、新治療方法評估及建立表達熒光素酶的轉染株,便於(yu) 體(ti) 內(nei) 外成像和藥效檢測。
MM.1S細胞(人多發性骨髓瘤細胞係)參數表
細胞名稱 | MM.1S細胞(人多發性骨髓瘤細胞係) |
細胞別名 | MM1.S, MM1-S, MM-1S |
物種 | 人類(Human) |
來源 | 多發性骨髓瘤患者外周血(42歲非裔美國女性患者) |
細胞類型 | B淋巴母細胞樣,終末分化的漿細胞樣(plasma cell-like lymphoblast) |
形態學 | 圓形,核偏心,常見雙核或多核,粗糙內質網發達,核仁明顯,細胞懸浮生長,伴輕微貼壁 |
生長速率 | 倍增時間約72-80小時(文獻報道66-88小時範圍內) |
免疫球蛋白表達 | 高表達IgA λ輕鏈(λ light chain),κ輕鏈極低或無表達 |
主要表麵抗原 | CD25 (約79%), CD38 (約96%), CD52 (約98%), CD59 (約96%), HLA-DR, PCA-1 |
缺失表麵標誌 | CD19, CD20(典型B細胞標誌陰性),CD10(低表達),CD45(低表達) |
受體表達 | 糖皮質激素受體(glucocorticoid receptor)表達,敏感於地塞米鬆(dexamethasone) |
其他分子特征 | MSI-low(微衛星不穩定性低),含有多發性骨髓瘤相關基因變異,具備完整的基因組和轉錄組數據(包括全外顯子測序、RNAseq等) |
培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1%P/S |
補充成分 | 10%胎牛血清(FBS),可選添加穀氨酰胺、青鏈黴素-鏈黴素(P/S)及抗真菌劑(如Fungizone) |
培養溫度 | 37℃ |
CO2濃度 | 5% |
生長方式 | 主要懸浮培養,部分細胞輕微貼壁 |
傳代比例 | 1:2至1:4 |
凍存液組成 | 50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO |
凍存條件 | 液氮中儲存 |
複蘇時間 | 複蘇後約2周恢複正常生長 |
微生物檢測 | 無支原體汙染 |
基因組編輯 | 有衍生株如BCMA敲除MM.1S細胞(CRISPR/Cas9技術) |
熒光標記 | 有穩定表達熒光素酶(Luc)和增強型綠色熒光蛋白(eGFP)的轉染株,用於體內外成像及藥效評估 |
研究用途 | 多發性骨髓瘤基礎機製研究,類固醇敏感性及耐藥機製,藥物篩選,新療法評估,細胞信號通路及細胞周期研究(如TGF-β誘導的生長抑製) |
細胞周期狀態 | 細胞在對數生長期,TGF-β處理可誘導G1期阻滯,抑製細胞增殖 |
相關Omics數據 | 基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、表觀遺傳學等多組學數據公開(COSMIC、DepMap、MD Anderson項目等 |
培養教程
MM.1S人多發性骨髓瘤細胞係培養教程
培養基準備
MM.1S細胞推薦使用RPMI-1640培養(yang) 基,補充以下成分以促進細胞生長:
10%胎牛血清(FBS)
1%青鏈黴素(Penicillin-Streptomycin)
可選添加:2 mM L-穀氨酰胺(L-Glutamine)
所有成分須在無菌條件下混勻後使用,並於(yu) 4°C保存,不超過兩(liang) 周。
培養條件
MM.1S細胞在懸浮狀態下生長,需維持以下培養(yang) 環境:
溫度:37°C
氣體(ti) 條件:5% CO₂
培養(yang) 器皿:T25或T75細胞培養(yang) 瓶,適用於(yu) 懸浮細胞
注意MM.1S細胞在培養(yang) 過程中易出現團聚現象,建議輕輕吹打混勻以維持均勻分布。
傳代方法
當MM.1S細胞密度達到0.8 × 10⁶ ~ 1.2 × 10⁶ cells/mL時應進行傳(chuan) 代,避免過度密集影響增殖:
收集細胞懸液,置入離心管;
1000 rpm 離心5分鍾,棄上清;
用新鮮預熱的培養(yang) 基重懸細胞,按1:2或1:3比例接種到新瓶中;
輕輕吹打使MM.1S細胞充分分散。
凍存與複蘇
凍存步驟:
收獲對數生長期MM.1S細胞,離心去除上清;
重懸於(yu) 凍存液中(90% FBS + 10% DMSO);
裝入凍存管,置於(yu) 程序降溫盒中於(yu) -80°C預凍過夜;
次日轉入液氮長期保存。
複蘇步驟:
37°C水浴迅速解凍;
立即轉入含有10 mL完全培養(yang) 基的離心管;
1000 rpm 離心5分鍾去除DMSO;
重懸後接種至新培養(yang) 瓶中,繼續培養(yang) MM.1S細胞。
注意事項
MM.1S細胞應定期檢測支原體(ti) 汙染;
建議每月進行一次細胞形態觀察與(yu) 生長曲線評估;
凍存前確保MM.1S細胞處於(yu) 健康生長狀態,以提高複蘇效率。
相關資料
- 人胚肺細胞與幹細胞的區別
- 人類胚胎肺細胞和幹細胞是兩種細胞類型,它們在多個方麵存在著顯著的差異,包括來源、特性和用途...
- 查看完整內容 >
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,14 |
D1S1656 | 11,12 |
D2S441 | 11 |
D2S1338 | 21,22 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 8,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 14 |
D10S1248 | 12,15 |
D12S391 | 17,24 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 11,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 29,30 |
D22S1045 | 10,11 |
FGA | 20,24 |
Penta D | 2.2,9 |
Penta E | 13,15 |
TH01 | 7,8 |
TPOX | 8 |
vWA | 15,17 |
參考文獻
下一篇:沒有了