TOV112D細胞株（人上皮性卵巢癌細胞株）

TOV112D細胞是來源於(yu) 人上皮性卵巢癌的細胞係，用於(yu) 研究卵巢癌的病理機製和進行藥物篩選。TOV112D細胞株最初於(yu) 1992年10月從(cong) 一名42歲的女性患者中分離出來，患者患有早發性惡性卵巢腺癌。分離工作由美國加利福尼亞(ya) 大學洛杉磯分校（UCLA）的Shin Imai博士團隊完成。

TOV-112D細胞係的染色體(ti) 核型顯示為(wei) 52，XX，具有多種染色體(ti) 的加倍或增加，例如X染色體(ti) 的增加、1號和22號染色體(ti) 的增加，以及多個(ge) 染色體(ti) 的複製。TOV-112D細胞係是研究卵巢癌的重要工具，尤其在病理研究和新藥開發中具有廣泛應用。

TOV112D細胞株特性特征

• 致瘤性：TOV112D細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 表現出致瘤性，能夠形成腫瘤。
  

• 集落形成：在軟瓊脂培養(yang) 基中能夠形成集落，顯示出TOV112D腫瘤細胞的特性。

• HER2/neu：陽性，表明TOV112D細胞係可能對某些靶向治療敏感。
  

• p53：存在突變（突變，Arg-->His外顯子6密碼子175突變），TOV112D細胞在腫瘤發生中可能存在p53通路的異常。

• 角蛋白表達：TOV112D細胞係表達角蛋白，進一步支持其上皮細胞的特性。
  

• 與(yu) TOV-21G和OV-90細胞係相比，TOV-112D細胞係在3p24染色體(ti) 上沒有缺失，顯示出其獨特的基因組特征
  

TOV112D細胞株參數表

TOV112D人上皮性卵巢癌細胞株培養教程

TOV112D細胞複蘇

• 取出TOV112D細胞凍存管，迅速放入37°C的水浴中解凍，輕輕搖晃凍存管，以確保均勻解凍，直至TOV112D細胞完全液化（約1-2分鍾）。
  

• 將解凍後的TOV112D細胞懸液迅速轉移至15 mL離心管中，加入4 mL預熱至37°C的DMEM高糖培養(yang) 基，輕輕混勻以稀釋DMSO。

• 在1000 rpm離心3分鍾，棄去上清液。

• 加入1-2 mL新鮮的DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打以重懸TOV112D細胞沉澱。

• 將重懸後的TOV112D細胞懸液轉移至10 cm培養(yang) 皿中，加入約8 mL DMEM培養(yang) 基，並將其放置在37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

TOV112D細胞傳代

• 當TOV112D細胞達到80%-90%的匯合度時，可進行傳(chuan) 代操作。
  

• 棄去培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液洗滌TOV112D細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基成分。

• 向培養(yang) 瓶中加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液，確保覆蓋TOV112D細胞單層，隨後棄去多餘(yu) 消化液。

• 將培養(yang) 瓶放入37°C培養(yang) 箱中消化1分鍾左右，觀察TOV112D細胞是否開始變圓並逐漸脫落。

• 當大部分TOV112D細胞脫落時，立即取出培養(yang) 瓶，加入等量的DMEM培養(yang) 基中和胰酶。

• 輕輕吹打培養(yang) 瓶底部，使TOV112D細胞完全脫落並均勻懸浮。

• 將TOV112D細胞懸液轉移至離心管中，1000 rpm離心3分鍾，棄去上清液。

• 加入適量新鮮DMEM培養(yang) 基重懸TOV112D細胞，按適當比例（通常為(wei) 1:3至1:5）分裝至新的培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

提高TOV112D細胞轉染效率的策略

• 選擇合適的轉染試劑：使用專(zhuan) 為(wei) 貼壁細胞設計的高效轉染試劑，如Lipofectamine 2000、JetPEI或Fugene HD。這些試劑通常能顯著提高TOV112D細胞的轉染效率。

• 細胞密度：確保TOV112D細胞在轉染前密度在70%-90%之間，這樣能優(you) 化細胞的轉染效率。
  

• 轉染時間：根據轉染試劑的使用說明，優(you) 化TOV112D細胞的轉染時間。通常轉染時間為(wei) 4-24小時，應根據實驗需求進行調整。

• 培養(yang) 基選擇：在轉染過程中使用無血清培養(yang) 基，以減少血清對TOV112D細胞轉染效率的幹擾。轉染完成後24小時內(nei) 更換為(wei) 含血清的培養(yang) 基。

• 增加DNA或RNA的用量：根據實驗需求，優(you) 化核酸濃度。質粒DNA或siRNA的濃度可在0.5-5 µg/mL範圍內(nei) 調整，以提高TOV112D細胞的轉染效率。

• 采用電轉染技術：如果實驗條件允許，電轉染（如使用Nucleofector）是一種有效提高TOV112D細胞轉染效率的技術，尤其適用於(yu) 難以轉染的細胞係。

• 監測TOV112D細胞轉染效果：在轉染質粒中加入報告基因（如GFP或Luciferase），以便於(yu) 監測TOV112D細胞的轉染效率和活力，及時調整實驗條件。

• 細胞預處理：在轉染前對TOV112D細胞進行短暫的預處理（如使用低濃度的胰酶處理）可以提高細胞膜的通透性，從(cong) 而提高轉染效率。

• 優(you) 化TOV112D細胞的培養(yang) 條件：確保TOV112D細胞處於(yu) 最佳狀態下生長，包括適當的溫度、CO2濃度和濕度等，以提高細胞活力和轉染效率。

• 反複優(you) 化：通過多次實驗，逐步優(you) 化各個(ge) 參數，記錄TOV112D細胞的實驗結果，最終找到最佳的轉染條件。