P815細胞（小鼠肥大細胞瘤細胞）

P815小鼠肥大細胞瘤細胞係是從(cong) DBA/2小鼠的肥大細胞瘤中分離出來。P815細胞最初是在小鼠體(ti) 內(nei) 檢測到的，之後被培養(yang) 成穩定的細胞係，廣泛用於(yu) 免疫學研究。

P815細胞特性特征

• 分子特征：產(chan) 生溶菌酶（lysozyme）、缺乏抗體(ti) 依賴的細胞介導的細胞毒作用

• 吞噬特征：能夠吞噬乳膠微球和小粒乳汁、不能吞噬酵母聚糖或卡介苗

• P815細胞對硫酸右旋糖苷、脂多糖（LPS）或結核菌素純蛋白衍生物（PPD）不敏感，這些物質不能抑製其生長

• P815細胞經檢測為(wei) 肢骨發育畸形病毒（鼠痘）陰性
  

• 基因表達特征：表達溶菌酶基因

P815小鼠肥大細胞瘤細胞參數表

P815小鼠肥大細胞瘤細胞培養教程

P815細胞接收處理

• 收到T25瓶裝P815細胞後，用75%酒精消毒瓶壁。

• 將T25瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中放置2-4小時，以穩定P815細胞狀態。

• 在顯微鏡下觀察P815細胞狀態，並拍照記錄。

P815細胞傳代方法

• P815細胞懸浮收集：收集培養(yang) 瓶中的P815細胞懸浮細胞、對於(yu) 輕微貼壁的P815細胞，可以使用細胞刮刀輕輕刮下。

• 離心：以1000rpm離心5分鍾，收集P815細胞、棄去上清液，保留P815細胞沉澱。

• 重懸：加入1-2ml新鮮完全培養(yang) 基重懸P815細胞。

• 傳(chuan) 代：按1:2到1:4的比例分配P815細胞到新的培養(yang) 容器中、每個(ge) 新容器中加入8ml新鮮完全培養(yang) 基。

P815細胞傳代密度和頻率

• 當P815細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 通常每周傳(chuan) 代3次。

• 以20萬(wan) P815細胞/mL密度開始新的培養(yang) 。

特別注意事項

• 首次傳(chuan) 代：建議使用1:2的比例以保證P815細胞的健康生長。

• 收集懸浮細胞：傳(chuan) 代時需確保收集培養(yang) 基中的所有懸浮P815細胞。

• 培養(yang) 基更換：運輸用的培養(yang) 基不可繼續用於(yu) P815細胞培養(yang) ，需更換為(wei) 新配製的完全培養(yang) 基。

P815細胞凍存細胞複蘇

• 收到凍存管後，立即轉入液氮或直接進行複蘇。

• 複蘇後，將P815細胞懸液轉移到離心管。

• 以1000rpm離心5分鍾。

• 加入10-15ml新鮮培養(yang) 液重懸P815細胞。

• 分配到兩(liang) 個(ge) T25培養(yang) 瓶內(nei) 進行P815細胞培養(yang) 。

P815細胞觀察和維護

• 顯微鏡觀察：定期在顯微鏡下觀察P815細胞狀態。

• pH值穩定：保持培養(yang) 基pH值穩定，必要時更換培養(yang) 基以維護P815細胞的健康。

• 防止汙染：操作時應保持無菌環境，注意防止P815細胞培養(yang) 中的細菌或真菌汙染。

P815細胞常見問題

• 細胞貼壁：部分P815細胞可能會(hui) 輕微貼壁，這是正常現象。

• 細胞密度控製：需維持適當的P815細胞密度，以保證細胞的健康生長。

• 培養(yang) 基問題：使用運輸用的培養(yang) 基繼續培養(yang) P815細胞可能會(hui) 影響細胞生長。

• 汙染風險：如其他細胞培養(yang) 一樣，需要注意防止P815細胞培養(yang) 中的細菌或真菌汙染。